最近一些研究人员提出,去除EhPTP2蛋白可以明显减少养殖对虾中的EHP传播。这对于进一步研究确定EHP生存和传播的重要基因,作为白对虾疾病预防和治疗措施的潜在靶点具有非常重要的意义。
由于没有完全有效的治疗方法,对虾EHP病的关注日益增加。
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一、对虾肝肠胞虫是一种严重,且无有效治疗的疾病。
对虾肝肠胞虫病(EHP)感染包括白对虾和斑节对虾在内的虾类肝胰腺和肠道,导致虾类出现生长缓慢和生产力下降。虾肝肠胞虫属于微孢子虫门的专性细胞内寄生虫,具有特征性感染性孢子,含有称为极管的侵入器官,极管是一种像弹簧一样卷曲的管状极性纤维。双层孢子壁由外层(外孢子)和富含几丁质的内层(内生孢子)组成,使孢子能够承受恶劣的外部环境。在适当的条件下,孢子形成细丝,穿透宿主细胞,开始其细胞内生命周期,这一过程称为萌发,极性纤维充当孢子通过其转移到宿主细胞中的导管。
RNA干扰(RNAi)是一种已被用于预防和治疗虾病毒性疾病的许多研究中的方法。本研究假设EhPTP2极丝蛋白参与孢子萌发。因此,研究预测去除EhPTP2将抑制EHP复制,减少EHP数量,减少EHP传播。这为开发基于EhPTP2抑制的EHP预防和治疗方法奠定了基础。
EHP极丝蛋白2 (PTP2) (EhPTP2) 是一种284个氨基酸的蛋白质,与微孢子虫门的其他物种具有共同的特征。此外,使用针对EhPTP2的抗体进行免疫荧光测定(IFA),EhPTP2定位于萌发孢子的极丝上,也是诊断EHP感染的新策略。
虾肝肠胞虫病(EHP)
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二、关于EhPTP2抑制的预防和治疗应用
由于EhPTP2参与极管挤出,这表明抑制EhPTP2信使核糖核酸(mRNA;参与细胞细胞内蛋白质合成)将抑制挤压,并导致EHP感染减少。当EhPTP2特异性双链核糖核酸(dsRNA;与大多数病毒性疾病有关,在dsRNA病毒的情况下,它形成病毒基因组,或者在病毒复制过程中在宿主细胞中产生)预先注射到体内时,情况实际上是这种情况。
应用RNAi技术进行预防时感染的抑制并不罕见,因为未受感染的虾在接触病原体之前,重要的毒力基因已被消除。例如,在一个池塘中,观察到群体内EHP感染水平差异很大。注射dsRNA并显示感染EHP的虾中25%可能高度感染EHP。如果可以应用第四剂dsRNAEhPTP2,则可以减少感染。这项研究的前景是,一旦感染确立,EhPTP2特异性dsRNA的使用就可以在两个方面进行治疗:
(1)减少受感染虾中EHP的数量;
(2)当虾池中虾受感染,可减少EHP在虾体内的进一步传播。
此外,发现EHP在肠道中萌发可能不会导致成功感染。除了之前报道的在肝胰腺(HP)中萌发外,还从肠道中分离出少量萌发的孢子,并通过EhPTP2的IHC进行检测。沿着虾的消化道,有一个胃筛(GS),充当过滤器,排除直径约0.2–0.7μm的颗粒。
较大的颗粒被输送到肠道而不是肝胰腺,由于EHP椭圆形孢子的平均尺寸约为1μm长,因此在肠道中检测到的萌发孢子可能源自已被胃从肝胰腺中消除的孢子的尺寸。当孢子萌发时,在肠道中检测到IHC的EhPTP2阳性信号。目前仍没有足够的证据表明肠道是EHP的另一个增殖部位。相反,该研究推测组织学结果中出现的萌发孢子是粪便污染的残留物,而不是主动感染。