本实验通过荧光法定量检测样品中残留的DNA含量，评估生物制品（如重组蛋白、病毒载体）的纯化效果，或验证生产过程中宿主细胞DNA的清除效率，确保产品符合法规要求。
三、实验流程
（一）、核酸提取
1、取50mg样本到1.5ml EP管；
2、用1×PBS补充样本体积至100ul；
3、每个100µL样本中加入10μL5MNaCl、100μL裂解液和10μL蛋白酶K，涡旋震荡30s，瞬时离心，65℃孵育 30min。
4、孵育完成后将离心管瞬时离心，之后依次加入109.2μL工作结合液、250μL异丙醇和20μL磁珠（磁珠使用前需充分混匀，确保每次加入的磁珠量均一致，以免造成DNA得率不一致），涡旋振荡5min，快速离心10s。
5、将离心管置于磁力架，轻轻地左右转动，待磁珠聚集于贴近磁力架的管壁后，保持离心管固定于磁力架上，用移液枪吸去上清，注意不要触碰磁珠。
6、加入500μL洗涤液（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），涡旋振荡30s，确保磁珠分散，离心管壁无聚集磁珠。快速离心10s后将离心管重新置于磁力架上轻轻地左右转动，待磁珠聚集于贴近磁力架的管壁后，静置1min， 用移液器小心吸去上清。
7、加入500μL新鲜配制的80%乙醇，涡旋振荡30s，确保磁珠分散，离心管壁无聚集磁珠。快速离心10s后将离心管重新置于磁力架上轻轻地左右转动，待磁珠聚集于贴近磁力架的管壁后，静置1min，用移液器小心吸去上清。
8、为保证尽量吸出残留乙醇，可将离心管快速离心10s后，置于磁力架上用10μL移液器吸出残留乙醇。
9、打开管盖室温干燥3-5min（干燥时间依具体情况进行延长或缩短；肉眼随时注意观察，避免磁珠过分干燥）。注：干燥过程中磁珠过干或有乙醇残留都会影响样本回收率。
10、将离心管从磁力架取下，每管加入100μL洗脱液，涡旋振荡1min，70℃孵育7min，期间每2-3min涡旋混匀一次。
11、孵育完成后，将离心管高速离心1min，然后静置于磁力架上，待磁珠分离后，用移液器小心转移上清到新的1.5mL离心管中。
（二）、核酸量检测
1、准备与需要检测的样本及标准品一致的0.5mlEP 管，并分别标记上对应名称；
2、在标准品管中加入10ul对应的标品；
3、在样本管中加入1ul对应的样本；
4、标品管与样本管中分别加入190ul 与199ul Qubit™ 1X dsDNA工作液；
5、涡旋5s混匀样本；
6、室温静置2min；
7、分别检测标准品与样本，并记录读数。
四、技术优势✅ 特异性强：仅结合双链DNA，避免RNA或单链DNA干扰
✅ 兼容性广：适用于血清、细胞裂解液、纯化产物等多种基质
✅ 超高灵敏度：检测下限低至0.1 pg/μL，适用于痕量DNA检测
四、适用范围1️⃣ 生物制药（重组蛋白、单抗、疫苗）的宿主细胞DNA残留检测
2️⃣ 基因治疗载体（AAV、慢病毒）的生产过程监控
3️⃣ 医疗器械（胶原支架、植入材料）的DNA残留评估
4️⃣ 食品工业中转基因成分的定量分析
5️⃣ 环境样本中微生物DNA的快速检测
六、代表性实验结果
样本RUF值检测浓度（ng/ul）原液浓度（ng/ul）原材料（ng/mg)占比（%）sample7281.883.651836.518436.51840.0000365七、客户提供1细胞样品: ＞2×107；细胞培养上清≥1ml动植物组织/细菌、真菌样品: ＞100mg（黄豆粒大小）；血清、血浆、全血及其他体液样品: ＞200μl；2注明样本类型、保存条件及可能干扰物（注：组织样品需液氮速冻、保存于-80度，样品使用干冰寄送）
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