弧菌无处遁形:水产研究社为您总结针对弧菌良方都有哪几种?

盼盼趣趣 2024-08-02 21:26:46

编辑 | 水产研究社

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针对弧菌比较有效的产品包括:益生菌类芽孢杆菌和乳酸菌,消毒杀菌类的纳米银和双氧水。

益生菌已经广泛用于对虾的生态养殖,通过调节和改善对虾养殖生态环境,控制和减少高密度对虾养殖过程中病害的发生。

一、枯草芽孢杆菌

目前,益生菌尤其是芽孢杆菌( Bacillus)在对虾育苗过程的应用研究也取得了一定进展。

在凡纳滨对虾苗种培育水体中添加枯草芽孢杆菌( B.subtilis),幼体发育速度明显加快,耐胁迫能力也显著增强。

NIMRAT 等在凡纳滨对虾早期发育时添加复合芽孢杆菌,研究结果表明,复合芽孢杆菌能够促进仔虾生长,并显著降低育苗水体中氨氮和亚硝氮的含量。

相较对照组而言,仔虾在添加复合益生菌芽孢杆菌的实验组中的存活率增加了约 15%。

另外,潘康成等和于鹏等的研究结果表明在水体中添加芽孢杆菌的微生态制剂或复合益生菌制剂能够显著提高对虾幼体的成活率,缩短幼体变态时间,促进幼体生长。

对虾育苗生产中,残饵及对虾幼体的分泌物、排泄物和残骸等的积累易导致水体中条件致病菌尤其是弧菌大量滋生,造成蚤状幼体后的幼体大量死亡。

通过配伍的复合益生菌芽孢杆菌显著提高了育苗水体和对虾幼体中 TBC 的含量并降低了 TPVB 相对含量。

因此,复合益生菌芽孢杆菌对幼体变态率和成活率的提高与零换水育苗水体和幼体体内相对较低的弧菌含量有着密切的联系。

ZOKAEIFAR 等在水体中应用枯草芽孢杆菌(10的8次方CFU/mL)能有效降低哈维氏弧菌引起的对虾死亡率。

胡毅等在饲料中添加芽孢杆菌等益生菌饲喂凡纳滨对虾显著降低了肠道和粪便中的弧菌含量。

这是因为,芽孢杆菌一方面可以抑制弧菌的增殖,同时芽孢杆菌分泌的酶可以提高对虾机体超氧化物歧化酶和过氧化氢酶(CAT)以及溶菌酶活性进而有限防治弧菌侵袭。

这也是我们看到市场上很多杀弧菌产品主要成分都是芽孢杆菌。大家可以留意一下。

现在市面上卖的最多的就是粉剂的芽孢杆菌,大部分都会说自家的菌含量达到一千亿,但是目前还没有哪一家做过试验验证过菌含量。

二、乳酸菌中的乳酸杆菌

大 量 的 研 究 表明 ,乳酸菌能够调节机体肠道正常菌群,保持微生态平衡,提高食物消化率和生物价,增强机体的免疫功能,提高机体的抗病能力;

产生抑菌活性代谢产物,如乳酸菌肽、细菌素、乳酸、过氧化氢、乙酸等,对许多革兰氏阳性菌李斯特氏菌、芽孢菌、梭菌等及革兰氏阴性菌大肠杆菌等有强烈的抑制作用;

可抑制肠道内腐败菌的生长繁殖和腐败产物的产生,乳酸菌被作为饲料添加剂而广泛应用于禽畜养殖中,防治腹泻、下痢、肠炎等肠道功能紊乱的许多疾病。

从表4可看出,在菌生长的对数期18 h时的发酵液对两种指示菌都无抑菌圈,随培养时间的延长,抑菌圈越来越大,生长衰退期(36 h)比稳定期(24h)的抑菌圈大,5d的陈培养液的抑菌圈最大。

原因可能是随着培养时间的延长,乳酸杆菌的生长及代谢产物抑菌物质的积累提高了其杀菌作用;

陈培养物和衰退期的发酵液的抑菌圈大于生长期及稳定期的抑菌圈,可能是一些抗菌活性物质在乳酸菌死亡后释放出来。

Gatesoupe(1999)通过每天添加乳杆菌在大菱鲆幼体活体食物的轮虫的培养基中,大大提高鱼成活率,当病原性弧菌侵袭幼体时,添加乳杆菌能够大大降低幼体在9d前的死亡率。

温馨提示:在使用乳酸菌益生素产品时,不应当只是利用其菌体,菌体及其代谢产物能一起使用效果可能会更好。尤其是发酵36小时的菌液更有效果!

三、双氧水、聚六亚甲基胍(PHMG)

而双氧水(H2O2)、聚六亚甲基胍(PHMG)作为新兴消毒剂,具有价格适中、高效杀菌、安全、无残留等优点(李志富等, 2009; 张慧等, 2010)。

在杀菌浓度及杀菌时间的关系上,0.5 μl/L PHMG作用 3 h、1 μl/L PHMG 作用 10 min 均可完全杀灭副溶血弧菌、哈维氏弧菌、Vibrio sp. Ex25 三种细菌;1 μl/L PHMG 作用 2 h 可完全杀灭溶藻弧菌。

0.5 μl/L 的 H2O2 作用 2 h 可完全杀灭 Vibrio sp.Ex25;1 μl/L 的 H2O2 作用 10 min 可完全杀灭副溶血弧菌、哈维氏弧菌、Vibrio sp. Ex25;1 μl/L 的 H2O2作用 2 h 可完全杀灭溶藻弧菌;

低浓度实验中,0.1 μl/L PHMG 作用 24 h,对 4 种细菌的杀灭率分别为 10.24%~38.84%、15.43%~41.36%、7.24%~35.95%和 12.36%~44.42%;

0.5 μl/L PHMG 作用 3 h,对副溶血弧菌、哈维氏弧菌、Vibrio sp. Ex25三种细菌的杀灭率分别从 50.95%、67.55%、64.67%增长到 100%;0.5 μl/L PHMG 作用 24 h,对溶藻弧菌的杀灭率为 34.14%~75.94%。

0.1 μl/L 的 H2O2 对副溶血弧菌作用 2 h 达到杀菌峰值,杀灭率为 37.48%;0.1 μl/L 的 H2O2 对哈维氏弧菌、溶藻弧菌、Vibrio sp. Ex25 作用 3 h 达到杀菌峰值,杀灭率分别为 47.73%、39.78%和 40.21%;

0.5 μl/L的 H2O2对副溶血弧菌作用 1 h达到杀菌峰值,杀灭率为 89.95%;0.5 μl/L 的 H2O2 对哈维氏弧菌、溶藻弧菌作用 2 h 达到杀菌峰值,杀灭率分别为89.98%和 72.46%;各浓度组在杀菌峰值之后杀灭率逐步降低。

实验发现,较低浓度的 PHMG 和双氧水具有较好的杀菌效果

由于各种消毒剂的消解及稳定性不同,在杀菌时间上,10 min 内 PHMG 和双氧水杀灭副溶血弧菌、哈维氏弧菌、Vibrio sp. Ex25 三种细菌的最低浓度均为 1 μl/L;

在 1 h 内,2 μl/L 二氧化氯可完全杀灭 4 株病原菌;在 2 h 内,1 μl/L 聚六亚甲基胍和双氧水可完全杀灭 4 种病原菌;

在本研究结果中,PHMG使用较小浓度可以在短时间内完全杀灭 4 株病原菌,且在一定时间范围内随着时间的推移对 4 种细菌的杀灭率逐渐增高,显示出高效且持续杀菌的能力。

在室外池塘的养殖生产过程中,养殖环境复杂多变,底泥、粪便及残饵中含有大量有机物会降低双氧水的杀菌作用。

相比较而言,室内工厂化养殖水体小、换水快,残饵和粪便等排除率高,更适于应用双氧水进行消毒。

PHMG 是一种环保型高分子聚合物,在工业、农业、医用和日常生活中有广泛的用途,而且价格低廉,无污染(黄新宇, 2015),用于水产类消毒不会产生细菌、病毒的耐药性,且不会对单胞藻造成伤害,是一种高效、安全的新型消毒剂(李妮妮等, 2015)。

综上所述,PHMG 杀菌浓度低、杀菌速度快、持续时间长,对致病性弧菌具有良好杀菌效果。

双氧水次之,具有较好的杀菌速度和低浓度杀菌效果,但杀菌的持续时间不长。

四、银米纳的杀菌机制

纳米银,是通过正电荷银离子之间的静电相互作用机制杀死细菌,攻击携带负电荷的细菌、真菌和病原体。银纳米离子会穿透细菌细胞和真菌细胞,导致局部瘫痪。从而使得病原体的氧气运输能力下降,最终导致他们被完全消灭。

纳米银制剂无论对养殖池水中的可培养细菌,还是对水生动物致病性细菌,即嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)和鰤诺卡氏菌(Nocardia seriolea)均显示出了较常用的2种水产用消毒剂更好的杀菌效率。

下面试验介绍几种消毒剂对养殖池水中可培养均的杀菌效果

几种消毒剂对两个养殖池塘水体中可培养细菌的杀灭效果见图1和图2。由图1和图2所示结果,表明纳米银对池塘水体中可培养菌具有较好的杀菌效力,当纳米银制剂在池塘水体中的浓度达到0.90mg/L时,就能产生较好的杀菌效果。其他几种消毒剂的杀菌效果,依次是醛制剂、碘制剂。

图1几种消毒剂对1#池塘水体中可培养细菌的杀菌效果

图2几种消毒剂对2#池塘水体中可培养细菌的杀菌效果

几种消毒剂对嗜水气单胞菌的杀菌效果

几种消毒剂对嗜水气单胞菌的杀灭效果见图3。由图3所示结果,表明纳米银对嗜水气单胞菌具有较好的杀菌效力,当纳米银制剂在池塘水体中的浓度达到0.60mg/L时,就能产生较好的杀菌效果。其他几种消毒剂的杀菌效果,依次是醛制剂、碘制剂。

图3几种消毒剂对嗜水气单胞菌的杀菌果

几种消毒剂对副溶血弧菌的杀菌效果

几种消毒剂对副溶血弧菌的杀灭效果见图4。由图4所示结果,表明纳米银对副溶血弧菌具有较好的杀菌效力,当纳米银制剂在池塘水体中的浓度达到0.30mg/L时,就能产生较好的杀菌效果。其他几种消毒剂的杀菌效果,依次是碘制剂、醛制剂。

图4几种消毒剂对副溶血弧菌的杀菌效果

几种消毒剂对鰤诺卡氏菌的杀菌效果

几种消毒剂对鰤诺卡氏菌的杀灭效果见图5。由图5所示结果,表明碘制剂对鰤诺卡氏菌具有较好的杀菌效力,当碘制剂在池塘水体中的浓度达到5.00mg/L时,就能产生较好的杀菌效果。其他几种消毒剂的杀菌效果,依次是醛制剂、纳米银制剂。

图5几种消毒剂对鰤诺卡氏菌的杀菌效果

有大量研究结果证明,银离子对水体中的微生物具有吸附作用,微生物被银吸附后,起呼吸作用的酶就失去功效,微生物就会迅速死亡。

银离子的杀菌能力比较强,在水体中只要有很低的银离子浓度,即可杀死水中大部分细菌。

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