阿维菌素类药物(Avermectins,AVMs)由链霉菌的发酵产物中分离的大环内酯类抗生素,包括伊维菌素、多拉菌素、阿维菌素、爱普菌素等品种。
阿维菌素类药物是目前兽医临床上应用最广泛的兽用驱虫药,被广泛应用于牛、羊等动物,其作用机理是干扰害虫神经生理活动,致使害虫出现麻痹而中毒死亡。今天程诚小编就带大家了解一下伊维菌素残留量的前处理方法。
我国农业农村部和国家市场监督管理总局2019年发布的《GB31650-2019食品安全国家标准食品中兽药最大残留限量》中明确规定了伊维菌素、多拉菌素、阿维菌素、乙酰氨基阿维菌素在动物靶组织中的残留限量。
本文阐述了如何将伊维菌素从样品基质中分离提取出来,并经过净化后,转化成液相色谱-串联质谱仪可以检测的形式。以提取、净化为重点,依据国标GB/T22953-2008,为检测人员和相关领域研究人员提供一定的参考。
检测项目:伊维菌素、阿维菌素、多拉菌素、乙酰氨基阿维菌素
应用范围:河豚鱼肌肉、鳗鱼肌肉、烤鳗
方法原理:河豚鱼、鳗鱼和烤鳗鱼中残留的阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素和乙酰氨基阿维菌素残留用乙腈提取后,正己烷脱脂,中性氧化铝柱净化。样品溶液供液相色谱-串联质谱仪检测,外标峰面积法定量。
1、提取。
准确称取2g组织样品(准确至0.01g)至50mL离心管中,加入8mL乙腈,匀浆机上8000r/min均质20s,4000r/min离心5min,上清液转移至50mL离心管中。
另取一50mL离心管加入8mL乙腈,洗涤匀浆刀头10s,洗涤液移入前一离心管中,用玻棒捣碎离心管中的沉淀,液体混匀器上振荡30s,4000r/min离心5min,上清液合并至50mL离心管,离心管中的沉淀再加入6mL乙腈,用玻棒捣碎离心管中的沉淀,液体混匀器上振荡30s,4000r/min离心5min,上清液合并至50mL离心管中,乙腈定容至25.0mL刻度,混匀备用。
2、净化
向上述装有样品提取液的50mL离心管中加入10mL乙腈饱和的正己烷脱脂,涡旋振荡1min,4000r/min离心5min,弃去上层正己烷,重复此操作一次,下层乙腈溶液待用。
将中性氧化铝净化柱安置在固相萃取装置上,准确移取10.0mL已脱脂的样品提取液至中性氧化铝净化柱中,控制流速在1mL/min~2mL/min,用2mL×2乙腈淋洗净化柱,收集全部流出液,流出液转移至吹氮管中,50℃下氮气吹至干,用1.00mL乙腈溶解残渣,并置超声波水浴中超声振荡10min,0.2μm滤膜过滤,供液相色谱-串联质谱测定。
程诚小编结语:阿维菌素类药物虽然作用剂量小,但其脂溶性较高,残留时间长,世界卫生组织将其列为高毒化合物。该类药物的不规范使用和食物链富集,易引发运动失调、呼吸缓慢、中枢神经系统中毒等症状,甚至致人死亡,对人类健康造成严重威胁,所以应对动物性食品中阿维菌素类药物含量进行监测。