编者按
原发性胆汁性胆管炎（PBC）是一种慢性、进行性的非化脓性炎症性疾病，最终可能导致胆汁淤积、肝纤维化，甚至肝硬化。随着诊断技术的进步，全球PBC的发病率显著增加，年发病率范围在每10万人中0.9至5.8例。现有证据表明CD8+T细胞反应参与了PBC发病过程。然而，PBC患者中CD8+T细胞的调控机制仍是一个尚未完全解开的谜题。在这些细胞中，CXCR6亚群引起了人们的关注。近日，发表于Hepatology International的一项研究探讨了PBC患者肝脏中CXCR6+CD8+T细胞的数量及其与临床数据、疾病严重程度和药物治疗反应的关系。
CXCR6+CD8+T细胞已被证实与多种肝脏和自身免疫性疾病的发病机理有关。然而，它们在PBC中的作用尚未阐明。基于此，研究者采用免疫组织化学和流式细胞术对PBC患者肝组织和外周血样本中的CXCR6+CD8+T细胞进行定量分析。然后，研究者进行了全面的统计分析，以评估这些细胞的丰度与PBC不同阶段的临床和病理数据之间的相关性。
外周血和肝脏中CXCR6+CD8+T细胞数量较高该研究最初的研究重点是评估PBC患者外周血单个核细胞（PBMCs）中CXCR6+CD3+CD8+T细胞的比例，并与健康对照（HCs）进行比较。流式细胞术分析结果显示，PBC患者CD3+CD8+T细胞中的CXCR6+细胞频率显著高于HCs（2.24%vs. 0.61%，P＜0.01）。同样，PBC队列中肝脏CXCR6+CD8+T细胞数量也显著高于HCs（图1）。
图1. PBC患者外周血和肝脏中CXCR6+CD8+T细胞数量较高 （源自文献）
不同病程PBC患者的CXCR6+CD8+T细胞差异该研究纳入了118例PBC受试者，根据Ludwig分类标准，将受试者分为早期PBC（E-PBC，n=62）和晚期PBC（L-PBC，n=56）两组。两组受试者的肝酶（ALT、AST、G、A、AKP、GGT、TBI、DBI、TBA）和血脂（LDL、Lipa）等指标水平差异有统计学意义（P＜0.05），但在性别、年龄、血细胞计数、胆固醇水平或自身抗体方面的差异无统计学意义（P＞0.05）。值得注意的是，与高倍视野（HPF）下的正常肝样本相比，E-PBC和L-PBC患者肝组织中CXCR6+CD8+T细胞的数量均显著增加（P=0.000）（图2），这表明CXCR6+CD8+T细胞与PBC的严重程度之间存在很强的相关性，可能暗示它们与疾病的进展有关。
图2. L-PBC和E-PBC受试者肝脏CXCR6+CD8+T细胞的苏木精-伊红（HE）染色和免疫组化染色 （源自文献）
CXCR6+CD8+T细胞与临床和病理参数的相关性研究者进行Spearman相关分析，发现CXCR6与AKP（P=0.003）、GGT（P＜0.000）水平呈正相关，然而与ALT（P=0.4679）和AST（P=0.2391）的相关性很小。这些结果表明，这种特异性T细胞亚群的丰度与AKP和GGT水平升高之间存在更强的相关性，表明它们参与胆管损伤过程，导致AKP和GGT显著升高（图3d~g）。
为了研究CXCR6+CD8+T细胞与ANA和IgM之间的关系，研究者进行了Spearman相关分析。该分析显示CXCR6表达与ANA（P=0.0033）、IgG（P=0.0370）、IgM（P=0.0047）呈正相关（图3h~j）。综上所述，从晚期PBC患者中分离的CXCR6+CD8+T细胞表现出炎症活性，提示其在PBC病理过程中的潜在作用。
图3. 肝脏CXCR6+CD8+T细胞数量与ALP、GGT、ANA、IgM、IgG水平呈正相关，与ALT、AST水平无相关性 （源自文献）
研究者采用HE和Masson染色技术，观察到CXCR6+CD8+T细胞与肝脏炎症和纤维化呈正相关。统计分析显示，CXCR6+细胞数量在不同PBC阶段以及不同炎症和纤维化程度之间差异有统计学意义（P≤0.007）（图4）。这些发现强烈提示CXCR6+CD8+T细胞参与PBC的炎症和纤维化过程。
图4. CXCR6+CD8+T细胞与炎症和纤维化程度的相关性较高 （源自文献）
熊去氧胆酸（UDCA）治疗反应与CXCR6+CD8+T细胞的关系在UDCA治疗后的随访研究中，研究者发现应答者（n=31）和非应答者（n=33）两组之间存在显著的生化和免疫组化差异（P＜0.05）。Wilcoxon秩和检验进一步表明，这两组之间肝脏CXCR6+CD8+T细胞水平存在显著差异（P=0.002）。
该研究探讨了CXCR6+CD8+T细胞在PBC中的作用，发现其在循环血液和肝脏组织中的数量显著增加，且与疾病严重程度和UDCA治疗反应密切相关。CXCR6+CD8+T细胞可能通过细胞毒性作用、炎症介质分泌和与其他免疫细胞的相互作用，在PBC的发病过程中发挥重要作用。未来需进一步探讨这些细胞的功能和调控机制，以揭示其在PBC及其并发症中的确切作用。
参考文献：Shi, H., Xu, X., Wang, S. et al. The relationship between CXCR6+CD8+T cells and clinicopathological parameters in patients with primary biliary cholangitis. Hepatol Int (2024). https://doi.org/10.1007/s12072-024-10715-0
