猪在使用抗菌药物前做药敏试验的原因与上述人类使用抗菌药物前做药敏试验的原因类似,主要是提高治疗效果、减少药物不良反应和控制耐药菌传播等,此外还能降低养殖成本,避免因盲目用药导致药物浪费。以下是猪做药敏试验的一般方法:
![](http://image.uc.cn/s/wemedia/s/upload/2024/91f12b2418e94855626a23fed833171e.jpg)
采样
• 采集病料:根据猪的症状确定采样部位,如呼吸道感染可取鼻拭子、肺组织;肠道感染取粪便、肠黏膜;全身性感染取血液、肝脾等组织。采集时要严格遵循无菌操作,防止杂菌污染。
• 保存与送检:将采集的病料放入无菌容器,加入适量保存液,如用于保存细菌的肉汤培养基等,低温保存并尽快送检,一般需在2小时内送达实验室,若不能及时送检,应在4℃左右保存。
细菌培养
• 接种培养:将病料接种到适宜的培养基上,如血琼脂平板、麦康凯平板等,根据可能的病原菌选择,在合适的温度(通常为37℃)和气体环境(需氧或厌氧)下培养18-24小时,使细菌生长形成菌落。
• 纯化培养:挑取单个菌落进行再次培养,以获得纯培养物,确保后续试验的准确性。
![](http://image.uc.cn/s/wemedia/s/upload/2024/dc216c2618a04652b6e5afd8c3938c80.webp)
药敏试验
• 纸片扩散法:将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种细菌的琼脂平板表面,药物在琼脂中扩散,在纸片周围形成不同浓度梯度。培养后测量抑菌圈直径,根据标准判断细菌对药物的敏感性。
![](http://image.uc.cn/s/wemedia/s/upload/2024/73d272ce1d6ab9ba39bd6b4c1c145e20.jpg)
• 稀释法:包括肉汤稀释法和琼脂稀释法,将抗菌药物进行系列稀释,与细菌共同培养,观察细菌生长情况,以确定最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),从而判断细菌对药物的敏感度。
• E-test法:是一种结合了纸片扩散法和稀释法原理的半定量药敏试验方法,使用含有呈指数浓度梯度抗菌药物的E-test纸条,贴在接种细菌的琼脂平板上,培养后根据纸条周围抑菌圈与纸条相交处的读数确定MIC。
![](http://image.uc.cn/s/wemedia/s/upload/2024/f68bc1d5815aaaa96c9e21442c8a4c3a.webp)
结果判读
• 敏感:表示细菌对该抗菌药物敏感,使用常规剂量的药物通常能有效抑制或杀灭细菌。
• 中介:意味着细菌对药物的敏感性处于临界状态,可能需要加大药物剂量或选择其他药物。
• 耐药:说明细菌对该药物不敏感,使用该药物治疗可能无效,应避免使用。