BV-2细胞大起底

BV-2来源以及特性

1990年，《Journal of Neuroimmunolo-gy》报道了一株通过用携带逆转录病毒（J2）的av-raf/v-myc癌基因感染原代小鼠小胶质细胞，从而获得的小鼠细胞系——BV-2[1]。

这是一株永生化的小鼠小胶质细胞系，组织来源是雌性C57BL/6小鼠脑组织。

01

形态特征：

该细胞系具备了原代培养的小胶质细胞的形态学特点，为多形性细胞，存在圆形和梭形两种形态。

悬浮形态多为圆形，贴壁形态则既有圆形又有梭形，部分细胞会有短触角或凸起伸出。

02

生长特性：半悬浮半贴壁

03

蛋白表达特性：

免疫组化结果显示BV2为MAC1、MAC2阳性，而MAC3、胶质细胞原纤维酸性蛋白、半乳糖脑苷脂为阴性。

04

BV2与ECO 2细胞系对比：

它们都是小鼠小胶质细胞系，但彼此之间存在明显差异。主要区别在于BV2通过基因操纵使细胞永生化，而ECO 2则是自发永生化的。此外，ECO 2具有与BV2相同的一般特征，但需要添加集落刺激因子-1 (CSF-1) 才能培养。

如何正确培养BV-2

到底要怎么培养这个细胞呢？

1

BV2细胞是半贴壁半悬浮细胞，细胞出现大量悬浮或者完全呈贴壁状态时，都要引起重视，及时调整培养条件。

应对措施：每天观察细胞状态，尤其是换了新批次的血清和培养基时，要多关注BV-2细胞状态，如果发现细胞状态发生变化，要及时回溯培养过程，进行调整。

2

对培养条件较敏感，当培养基出现偏酸或者偏碱的情况时，细胞会出现大量脱落，悬浮生长。

应对措施：一般培养基中添加了酚红作为PH指示剂，要经常观察培养基颜色，判断培养基PH是否合适。

3

BV2细胞传代密度偏低时，易出现细胞触角变多、变长的情况。

应对措施：触角变多、变长的细胞贴壁会更牢，更不容易被胰酶消化下来，可以通过短时消化的方式，筛选掉这部分细胞，仅收集正常状态的BV-2进行培养。

具体操作：

（1）先轻轻吹打下部分贴壁不牢的细胞，和悬浮细胞一起收集下来。

（2）再用胰酶进行短时消化（1min），收集下脱落的细胞。

（3）将前面收集的细胞悬液进行离心收集（800~1000rpm，离心5min），再转移入新培养瓶中继续培养。

参考文献：

[1]. Blasi E, Barluzzi R, Bocchini V, Mazzolla R, Bistoni F. Immortalization of murine microglial cells by a v-raf/v-myc carrying retrovirus. J Neuroimmunol. 1990 May;27(2-3):229-37. doi: 10.1016/0165-5728(90)90073-v. PMID: 2110186.