上海富衡|转染细胞质粒提取环境的重要性及污染防控措施

小衡衡 2024-12-19 09:37:07

在细胞转染实验中,质粒的提取环境至关重要。理想情况下,用于转染细胞的质粒应在超净台提取,这是保证细胞免受污染的关键步骤之一。

超净台能够提供一个相对无菌的操作环境,通过高效过滤器过滤空气,有效去除空气中的尘埃粒子和微生物,极大地降低了质粒提取过程中引入细菌、真菌以及其他杂质的风险。在超净台内,规范的操作流程如紫外灯灭菌、酒精擦拭台面及仪器等操作,进一步保障了提取环境的无菌性,从而确保获得高纯度、无污染的质粒,为后续细胞转染实验的成功奠定基础。

然而,如果无法在超净台提取质粒,要保证细胞不被污染则需要采取一系列严格且谨慎的措施。首先,操作前要确保整个实验室空间的清洁,用消毒液拖地和擦拭实验台、仪器表面,减少环境中的微生物数量。操作人员需身着洁净的实验服、口罩和手套,并定期更换,防止人体携带的微生物污染实验材料。

提取过程中,所有使用的试剂、耗材都应经过严格的灭菌处理,例如使用高压蒸汽灭菌锅对离心管、移液器枪头、溶液瓶等进行灭菌,避免因这些物品携带微生物而污染质粒。同时,尽量减少试剂和质粒暴露在空气中的时间,在打开装有质粒的容器或试剂瓶后,迅速完成操作并及时封闭。对于溶液的配制,应使用无菌水和经过过滤除菌的缓冲液,防止水源性污染。

此外,设立专门的质粒提取区域,与细胞培养区域完全分开,避免交叉污染。提取完成后,对质粒进行严格的质量检测,包括通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性和纯度,以及采用微生物培养检测法排查是否存在细菌或真菌污染,只有确保无污染的质粒才能用于细胞转染实验,以最大程度地保障细胞转染实验不受污染因素的干扰,获得可靠的实验结果。

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小衡衡

简介:一个从事生物科技,专注于细胞相关技术、服务的打工仔