上海富衡|小鼠BMDM巨噬细胞的培养方法

小衡衡 2024-10-21 09:49:01

小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)在免疫学、细胞生物学等研究领域中具有重要的应用价值。以下是小鼠 BMDM 巨噬细胞的培养方法。

首先,获取小鼠的骨髓细胞。通常从小鼠的股骨和胫骨中抽取骨髓。在无菌条件下,小心地分离小鼠的股骨和胫骨,去除周围的肌肉组织,用无菌的注射器吸取适量的培养基冲洗骨髓腔,收集骨髓细胞悬液。

将收集到的骨髓细胞接种到培养瓶或培养板中,加入含有特定细胞因子的培养基。一般来说,常用的细胞因子是巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF),它能够促进骨髓细胞向巨噬细胞分化。培养基的选择也很重要,通常使用含有高糖的 DMEM 培养基,并添加适量的血清、抗生素等成分。

将细胞置于适宜的培养环境中,一般为 37℃、5% CO₂ 的培养箱。在培养过程中,需要密切观察细胞的生长状态。在培养的初期,骨髓细胞会逐渐贴壁生长,并开始向巨噬细胞分化。随着时间的推移,细胞的形态会逐渐发生变化,变得更加扁平,具有巨噬细胞的典型形态特征。

在培养过程中,要注意定期更换培养基。一般每隔 2-3 天更换一次培养基,以保持细胞的营养供应和生长环境的稳定。同时,要注意观察细胞是否有污染的迹象,如培养基变浑浊、出现细菌或真菌等。如果发现污染,应及时处理,避免影响实验结果。

当细胞生长至足够数量时,可以进行后续的实验操作。在进行实验前,可以对细胞进行鉴定,如通过形态学观察、免疫细胞化学染色等方法确定细胞是否为巨噬细胞。

总之,小鼠 BMDM 巨噬细胞的培养需要严格的无菌操作、合适的培养基和细胞因子以及适宜的培养环境。通过精心的培养和管理,可以获得高质量的小鼠 BMDM 巨噬细胞,为相关的科学研究提供有力的支持。

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小衡衡

简介:一个从事生物科技,专注于细胞相关技术、服务的打工仔