AbMole精研抑制剂十年，最新的科研动态不断与您分享。本期与您分享的是:NFATc1对地塞米松诱导的TGFβ2表达的调控在小梁网细胞中是细胞周期依赖的。

尽管TGFβ2水平升高似乎是青光眼发病的一个致病因素，但很少了解TGFβ2在小梁网(TM)中的表达是如何调节的。在这里，我们研究了细胞因子调节因子NFATc1的激活是否通过地塞米松(DEX)诱导NFATc1活性来控制TGFβ2在人TM细胞中的转录。

这项研究同时使用了增殖细胞和细胞周期停滞的静止细胞。细胞周期阻滞通过细胞-细胞接触抑制或血清饥饿来实现。通过β-catenin染色和p21、Ki-67核标记验证细胞-细胞接触的形成和细胞周期的活性。使用NFATc1抑制剂环孢素A (CsA)或11R-VIVIT来确定NFATc1的作用。RT-qPCR检测mRNA水平。DEX可使增殖细胞TGFβ2mRNA表达增加3.5倍，但在静止细胞或血清饥饿细胞中无明显变化，CsA和11R-VIVIT均可抑制这种增加。相比之下，其他DEX/NFATc1诱导的mRNAs (心肌素和β3整合素)的表达与细胞的增殖状态无关。这些研究表明NFATc1在TM细胞中调控TGFβ2的转录，揭示了TM细胞周期与NFATc1和/或DEX在TM细胞中调控基因表达之间的未知联系。

11R-VIVIT（Abmole，M1261，纯度>99%）是钙调神经磷酸酶介导的活化T细胞核因子去磷酸化(NFAT)的选择性抑制剂。在抑制细胞提取物中钙调神经磷酸酶介导的NFAT1、NFAT2和NFAT4去磷酸化方面表现优异。

Figure 7. Inhibition of NFATc1 blocks DEX-induced TGFβ2 and myocilin mRNA increases in proliferating HTM cells.

既往研究表明，DEX诱导静止HTM细胞心肌素和β3整合素的上调涉及CaN/NFATc1通路。由于已知NFATc1参与调节细胞因子生成，包括TGFβ，并且也被认为调节TGFβ活性，我们想确定NFATc1活性是否参与调节增殖HTM细胞中TGFβ2mRNA的表达。为此，我们用钙调磷酸酶抑制剂环孢素A (CsA)或NFAT c1抑制剂肽11R-VIVIT(VIVIT)处理10%血清中生长的增殖细胞。

如图7A所示，CsA完全阻断了DEX诱导的TGFβ2 mRNA水平的升高。在无治疗组中，它似乎也导致了基础TGFβ2 mRNA水平的降低。正如预期的那样，CsA在增殖的HTM细胞中完全阻断了DEX诱导的心肌蛋白mRNA的表达(图7B)。与CsA一样，VIVIT对DEX的反应也显著降低TGFβ2和心肌素mRNA水平(图7C,D)，但与CsA程度不同。总之，这些研究表明，DEX诱导的NFATc1活性的激活调节了增殖HTM细胞中TGFβ2和心肌蛋白的表达。

鸣谢：Mark S Filla, et al. Cells. 2023 Feb 3;12(3):504.