在微生物限度检测中,为避免滤膜堵塞问题,可以从以下几个方面入手:
供试品预处理
离心处理:对于含有较多颗粒性杂质的供试品,如一些中药制剂、混悬液等,可以通过离心的方式,预先将大颗粒杂质沉淀分离出来。例如在检测某种含有大量药渣颗粒的中药口服液时,先以适当的转速(如 3000 - 5000r/min)离心 5 - 10 分钟,取上清液进行过滤,这样就能减少进入滤膜的杂质。
稀释处理:当供试品浓度过高或黏稠度较大时,考虑适当稀释。比如检测高浓度的糖浆剂,将其按照一定比例(如 1:10 或 1:20)用无菌生理盐水进行稀释,降低供试品的黏稠度和杂质含量,从而减轻滤膜的负担。
过滤前的澄清处理:使用滤纸、滤网等初步过滤供试品,拦截较大的固体颗粒。如在检测含有不溶性纤维的供试品时,先用粗滤纸过滤,除去纤维,然后再通过微生物薄膜过滤器进行过滤,这就像是在河流入口设置一个栅栏,先拦住较大的漂浮物,让水流更顺畅地进入后面精细的过滤装置。
滤膜选择与维护
选择合适孔径的滤膜:根据供试品中微生物的大小和可能含有的杂质情况来选择滤膜孔径。如果是检测细菌为主的供试品,一般选择 0.45μm 的滤膜;如果是检测酵母菌和霉菌,0.6 - 0.8μm 的滤膜可能更合适。例如在检测普通的药品注射剂,0.45μm 的滤膜既能有效截留细菌,又不容易被注射剂中的少量微小颗粒堵塞。
选择合适材质的滤膜:滤膜材质有多种,如混合纤维素酯、聚醚砜等。混合纤维素酯滤膜亲水性较好,适用于水性供试品;聚醚砜滤膜化学稳定性和热稳定性高,适用于一些含有机溶剂或需要高温过滤的供试品。比如检测含有乙醇的消毒剂,选择聚醚砜滤膜可以避免滤膜被有机溶剂破坏而堵塞。
检查滤膜质量:在使用滤膜前,仔细检查滤膜是否有破损、瑕疵或者不均匀的情况。有缺陷的滤膜可能导致局部堵塞或者过滤效果不佳。
过滤操作优化
控制过滤压力:使用合适的压力进行过滤,避免压力过高。一般来说,过滤压力保持在较低水平,如 0.1 - 0.2MPa 左右,既能保证过滤的顺利进行,又能减少因压力过大导致杂质强行通过滤膜或者堵塞滤膜的情况。
控制过滤速度:过滤速度不宜过快,要根据供试品的性质和滤膜的特性来调整。例如对于比较黏稠的供试品,过滤速度应该适当放慢,让供试品有足够的时间通过滤膜,防止大量供试品短时间内堆积在滤膜表面而堵塞滤膜。
采用分步过滤:对于杂质含量高的供试品,可以采用分步过滤的方法。先使用较大孔径的滤膜进行初步过滤,去除大部分杂质,然后再使用微生物薄膜过滤器进行精细过滤,这样可以大大降低微生物薄膜过滤器滤膜堵塞的风险。