耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA）获得mecA，其编码细胞壁肽聚糖生物合成组分青霉素结合蛋白2a (penicillin-binding protein 2a，PBP2a)，使其对β-内酰胺类抗生素产生耐药性，是临床关注的主要问题。这篇文章表明在抗生素的存在下，MRSA采用另一种细胞分裂模式，并在分裂隔膜（division septum）处显示出改变的肽聚糖结构。PBP2a可以取代内源性和必需的PBP2的转肽酶活性，但不能取代PBP1的转肽酶活性，PBP1负责独特的天然间隔肽聚糖结构（native septal peptidoglycan architecture）。没有PBP1活性的成功分裂需要不同的分裂模式，并由几种可能的染色体增强子（potentiator，pot）突变实现。MRSA增敏剂（resensitizing agent）对抗生素耐药性所需的两种相互依赖的干扰机制是不同的，这为新的干预措施提供了机会。
自最早的抗生素青霉菌进入临床起，伴随着抗生素的大量使用和细菌的快速进化，抗生素耐药性已经成为日益严峻的全球公共卫生威胁。
在青霉素用于治疗金黄色葡萄球菌后不久，对青霉素耐药的菌株就出现了；1959年，抗生素甲氧西林的诞生成功治疗了耐青霉素金黄色葡萄球菌菌株，但仅仅一年后，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（Methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA）感染的出现带来了新一轮的危机。如今，MRSA仍在严重威胁着人类健康，每年有超过12万人死于这种“超级细菌”。
MRSA的高度耐药性是如何形成的？本周，发表于《科学》杂志的最新研究告诉我们，原来我们一直小瞧了这些“超级细菌”的耐药本领。来自英国谢菲尔德大学的研究团队发现，除了已知的耐药机制，高度耐药性MRSA还可以通过一种前所未知的细胞分裂机制，在高浓度甲氧西林中生存、繁衍。这项发现为开发针对高度耐药菌的新型抗生素提供了新的机遇。
要理解MRSA的耐药机制，我们首先要知道，甲氧西林是如何杀死细菌的。甲氧西林属于β-内酰胺类抗生素，这也是如今最常见的抗生素类型。
细菌的生存离不开细胞壁的保护，而细胞壁的主要构造单元是由糖和氨基酸组成的肽聚糖。但只有肽聚糖还不够，要想将这些“砖块”砌成一堵“墙壁”，青霉素结合蛋白（penicillin-binding protein, PBP）扮演着 “水泥”的角色，这种酶可以将肽聚糖交联成完整的细胞壁，并且参与细胞壁的修复。
而β-内酰胺类抗生素的作用对象正是PBP。抗生素与PBP结合后，可以抑制后者的活性，阻止新细胞壁的形成与细胞壁修复，从而杀死失去了完整细胞壁保护的细菌。不过，MRSA的出现带来了新的变数。
MRSA在青霉素进入临床之前就已存在，而青霉素的使用作为一种选择压力，驱动了MRSA的传播。已有的研究认为，MRSA的耐药性是通过突变获得mecA基因而产生的。PBP包括了PBP1、PBP2等类型，而mecA基因可以编码一种独特的PBP酶——PBP2a。与天然PBP不同的是，PBP2a对β-内酰胺的亲和力很低，因此很难被β-内酰胺类抗生素结合。也就是说，这类抗生素无法抑制PBP2a的活性，这导致了MRSA可以在甲氧西林存在的情况下组装细胞壁、持续分裂。
不过需要指出的是，虽然是耐药菌，但绝大多数MRSA的耐药能力是有限的，只能在略高于最低抑菌浓度的甲氧西林中增殖。而造成更大健康威胁的，是MRSA中万里挑一的高度耐药性MRSA，这种现象称作异质性耐药性。
在高浓度抗生素环境中，只有这些极少数的高度耐药性MRSA可以延续细胞复制。这时，上面介绍的过程将不足以讲述这些MRSA耐药的完整故事。
为了找到高度耐药性MRSA可能的耐药新机制，研究团队首先使用能够展示细胞膜细节的原子力显微镜，对比观察了高度耐药性MRSA与甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）的肽聚糖结构。
细菌分裂时，两个子代细胞中间部分的新细胞壁被称为隔膜（septa）。在没有抗生素的环境中，MSSA和MRSA的隔膜外表面展现出相同的特征——肽聚糖形成了如下图左所示的同心环状结构。
但在高浓度的甲氧西林环境中，不同细菌的隔膜外表面结构出现了分化。MSSA和普通MRSA的隔膜上出现了大的孔洞，遭到破坏的细胞壁也无法保护这些细菌；与此同时，高度耐药性MRSA的隔膜出现了令人意外的变化——同心环消失了，取而代之的是独特的小孔径致密网状肽聚糖结构（如下图右所示）。
▲不存在抗生素时，MRSA隔膜的肽聚糖形成同心环状结构（左）；在高浓度抗生素存在时，高度耐药性MRSA的肽聚糖转变为小孔径致密网状（右）。（图片来源：参考资料[1]）
接下来，研究团队解释了不同细菌中的肽聚糖结构变化。研究团队发现，让肽聚糖交联形成同心环状网络的，是PBP1蛋白。对于MRSA，mecA基因编码的PBP2a可以替代天然PBP2的活性，让细菌在低浓度甲氧西林中存活。然而，PBP2a无法替代PBP1的活性，因此在高浓度甲氧西林中，PBP2a无法修复出现大孔洞的细胞壁。因此，高度耐药性MRSA的存活以及全新的致密网状隔膜还需要其他的解释。
随后的分子分析找到了在高浓度抗生素环境中，高度耐药性MRSA可以切换的第二种分裂模式。rpoB基因编码RNA聚合酶基因的β亚基，研究发现第二种分裂模式正是由rpoB突变介导的。在PBP1活性缺失的情况下，rpoB突变以及其他几种pot突变使得隔膜形成独特的致密网状结构，维持了细胞壁的完整性。
由此，这项研究为我们描绘出了更加完整的MRSA耐药机制。首先，mecA突变让所有MRSA获得了抵御低浓度甲氧西林的能力；在此基础上，高度耐药性MRSA额外拥有的rpoB突变让它们在高浓度甲氧西林中也能延续细胞分裂。
▲mecA突变和rpoB等pot突变共同构成了高度耐药性MRSA的耐药机制（图片来源：参考资料[1]）
在揭示了高度耐药机制后，研究团队还进一步找到了几种化合物，用于抑制携带不同mecA、pbp2、pbp1和rpoB突变组合的金黄色葡萄球菌生长。同期的观点文章指出，这项新发现阐明了理解耐甲氧西林和更普遍耐药性的机制的重要性，并将促使人们找到克服对β-内酰胺类抗生素耐药的新疗法。
参考资料：
[1] Adedeji-Olulana et al., Two codependent routes lead to high-level MRSA. Science (2024). DOI: 10.1126/science.adn1369
[2] Ewan Harrison. Bacteria divide to conquer antibiotics. Science (2024). DOI: 10.1126/science.adt0042
